目的 探究小鼠小肠固有层单细胞悬液制备的最佳酶消化法。
方法 采集 10 根长度一致的小鼠 小肠,随机分为两组,每组分别采用以胶原酶 A 或胶原酶 VIII 为主的酶消化法制备固有层单细胞悬液,比较这两种 酶消化法对单细胞悬液细胞获得率、细胞活性和细胞表面抗原的影响,然后对较优酶消化法制备的单细胞悬液进 行流式检测。
结果 与以胶原酶 VIII 为主的酶消化法相比,以胶原酶 A 为主的酶消化法可以获得更高的细胞产量 (9.48±1.10)×10 9 vs(4.18±1.02)×10 9 、活细胞比例(86.36±3.32)% vs(61.62±10.93)%以及活性 CD45 +细胞比例 (57.19±5.11)% vs(26.01±11.44)%、活性 CD3 +细胞比例(8.73±2.89)% vs(4.52±2.49)%、活性 CD4 +细胞比例 (6.19±2.09)% vs(3.22±1.91)%和活性 B220 +细胞比例(15.06±4.27)% vs(5.07±2.20)%,为后续流式检测提供 了高质量细胞。
结论 以胶原酶 A 为主的酶消化法更适合于小鼠小肠固有层单细胞悬液的制备。
阅读原文:小鼠肠道固有层单细胞悬液制备的酶消化法比较研究.pdf
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